エサの配合が変わるだけで、その個体の線溶活性にバラツキが見られる。環境、エサ、飼育方法で変動する。用途別に飼育が可能。
基質と酵素は鍵と鍵穴の関係で、酵素の構造によって特定の基質と特異的に反応するしくみ。酵素反応によって、合成アミド基質に付加している発色剤（pNA）が遊離（酵素によって加水分解されpNAが分離される）され、酵素と基質の選択性（感度）が良い程、反応液がpNAによって強く発色される。酵素との反応性が悪い程、発色量は少なくなる。
溶液中に含まれる蛋白質量（今回はBradford法による牛アルブミン量で換算）を基準に比較することで、溶液濃度の誤差（秤量時のバラツキ）などが低減できる。基準になるものがないと、活性の比較検討できない。
原末を加熱殺菌処理しても線溶活性（フィブリン分解、合成アミド基質分解）は、熱による酵素失活がなく、成分は残っている。特許 第４８８６０１７号（熱処理）
加熱殺菌処理の温度と時間で120℃、短時間であれば線溶活性（フィブリン分解、合成アミド基質分解）は、熱による酵素失活がなく、成分は残っている。
| 時間 （分） |
加熱温度 （℃） |
フィブリン分解面積 （mm2） |
一般細菌数 （CFU/g） |
大腸菌群 （CFU/g） |
耐熱性菌群 （CFU/g） |
|---|---|---|---|---|---|
| 0 | 0 | 479.6 | 94000 | 陰性 | 3500 |
| 30 | 120 | 373.8 | 440 | 陰性 | 10 |
| 45 | 120 | 370.0 | 400 | 陰性 | 検出できず |
| 60 | 120 | 369.3 | 220 | 陰性 | 検出できず |
| 75 | 120 | 365.4 | 160 | 陰性 | 検出できず |
菌数分析は（株）静環検査センターに依頼
加熱殺菌処理120℃の短時間であっても一般細菌を含め大腸菌群などへの殺菌効果は良くなっている。
| 1時間 | 2時間 | 3時間 | 4時間 | |
|---|---|---|---|---|
| A : 旧SK末 | 110.2mm2 | 184.0mm2 | 261.3mm2 | 333.6mm2 |
| B : SK末 | 124.0mm2 | 206.4mm2 | 290.1mm2 | 369.3mm2 |
| C : 新SK末 | 123.7mm2 | 209.1mm2 | 292.2mm2 | 368.4mm2 |
原料末加工技術の進歩において、フィブリン分解の大きさは維持もしくは上昇傾向である。しかし、フィブリン分解面積は、目視での計測のため、フィブリン平板のコンディションや試験溶液のフィブリンへの乗せ方次第で変動する。よって、目視以外で酵素学的に試験する必要がある。そこで酵素と基質の特異的反応による合成基質分解法で数値化し酵素力価を測定する。酵素学的に国際単位などを設定するのに用いられる方法である。
基質の中から、最も特異性に優れた基質1を選択して、線溶系力価を試験している。
原末の養殖加工進歩に伴い、蛋白質量が減少している。線溶活性には必要でない蛋白質が取り除かれていると思われる。
独自の養殖、洗浄、加工方法によって、線溶活性は維持でき、不要な蛋白質が取り除かれ、蛋白質あたりの比活性が旧SK末に比べ、2倍、4倍と向上している。
各原末別の各原末別のポリアクリルアミドゲルで泳動後、フィブリンザイモグラフィー
12.5%ポリアクリルアミドゲル泳動
電気泳動法によってミミズ酵素を含む蛋白質を分離することで、蛋白質の分子量で細分化できる。ポリアクリルアミドゲルで泳動したゲルを特殊な方法によって処理し、フィブリン平板上に重層して反応させると、線溶活性のある部分のみフィブリンが分解する。既報通りに6区分の線溶活性が見られ、養殖〜洗浄〜加工方法によって酵素が壊れる（失活する）ことなく維持できている。
各原末別のポリアクリルアミドゲルで泳動後、CBB染色
12.5%ポリアクリルアミドゲル泳動
蛋白質分離後のゲル染色において、技術の進歩によって染色濃度が薄くなっており、線溶活性に必要な蛋白質はそのままで、要らない蛋白質が除去できている。
